Скачать 6.8 Mb.
|
Аллекрад Х., Попова Т.Н., Матасова Л.В., Клокова А.И Воронежский государственный университет, г. Воронеж, 394006, Университетская пл., 1, (4732)208278, larissamatasova@yandex.ru Известно, что хроническая алкогольная интоксикация приводит к окислительному стрессу путем усиления образования свободных радикалов и разрушения антиоксидантной системы защиты в клетках [Koch O.R., 1991]. В настоящее время внимание исследователей привлекают средства антиоксидантной защиты, в основе которых лежат естественные метаболиты клеток. Мелатонин, продуцируемый эпифизом и экстрапинеальными тканями, участвует в синхронизации биоритмов, регуляции репродуктивной и иммунной систем, антистрессовой защите [Yu H.S., 1993]. Тиоктовая кислота (ТК; α-липоевая кислота) - кофермент пируватдегидрогеназного и 2-оксоглутаратдегидрогеназного комплексов. Целью работы явилось исследование влияния мелатонина и тиоктовой кислоты на активность каталазы в тканях крыс при хронической алкогольной интоксикации. В качестве объекта исследования использовались белые лабораторные крысы-самцы массой 150-200 г. В ходе эксперимента животные были разделены на пять групп: в 1 й группе (n=19) крыс содержали на стандартном режиме вивария; 2 ю группу (n=12) составляли животные с хронической алкогольной интоксикацией, которую создавали путем добавления к стандартному рациону 15% этанола регулярно в течение месяца; в 3 й группе (n=9) животным с 14 дня развития патологии внутрибрюшинно вводили ТК в дозе 35 мг/кг каждые 48 часов в течение последующих 14 дней; крысам 4 й группы (n=8) по аналогичной схеме вводили ТК в дозе 70 мг/кг; крысам 5 й группы (n=9) по представленной выше схеме вводили мелатонин в дозе 1 мг/кг; крысам 6 й группы (n=10) по той же схеме вводили мелатонин в дозе 2 мг/кг. Материал для исследования забирали через 28 дней после начала алкоголизации. Метод определения активности каталазы основан на способности пероксида водорода образовывать с молибдатом аммония комплекс, концентрацию которого определяли при длине волны 410 нм [Королюк М.А., 1988]. Данные обрабатывали с использованием t–критерия Стьюдента, различия считали достоверными при p<0,05. При хронической алкогольной интоксикации наблюдалось повышение активности каталазы по сравнению с контрольными значениями: в печени и сердце в 2,7 и 2,2 раза соответственно, в сыворотке крови крыс - в 3 раза. Активация каталазы имеет значение не только для обезвреживания пероксидов, но и для ускорения окисления алкоголя. При введении тиоктовой кислоты в дозах 35 и 70 мг/кг было выявлено снижение активности каталазы по сравнению со значениями при патологии: в печени в 1,8 и 1,9 раза, в сердце – в 1,5 и 1,6 раза, в сыворотке крови - в 1,2 и 1,4 раза по сравнению С данными при патологии. При введении мелатонина в дозах 1 и 2 мг/кг активность каталазы также снижалась по сравнению со значениями при патологии: в печени в 1,7 и 1,8 раза, в сердце – в 1,3 и 1,8 раза, в сыворотке крови - в 1,1 и 1,7 раза. Полученные данные могут быть объяснены антиоксидантным действием ТК [Smith A.R., 2004] и мелатонина [Reiter R.J., 2000]. Кроме того, ТК, являясь коферментом, может активировать окисление продукта метаболизма алкоголя ацетил-КоА в печени, снижая его использование в процессе биосинтеза жирных кислот и предотвращая жировое перерождение печени. ОСОБЫЕ СТРУКТУРЫ ВОДЫ (ОСВ), КАК УНИВЕРСАЛЬНЫЕ БИОАНТИОКСИДАНТЫ РЕГУЛЯТОРЫ СВОБОДНО-РАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ В БИОЛОГИЧЕСКИХ СИСТЕМАХ: ЧТО ОБ ЭТОМ ПОВЕДАЛИ ГИДРАТИРОВАННЫЕ ФУЛЛЕРЕНЫ. Андриевский Г.В. Институт Физиологически Активных Соединений, 61072, Харьков, Украина, пр. Ленина, 58; Тел.: +38 057 763 0521 E-mail: yard@kharkov.ua В сентябре 2005 в своем письме академику РАН Скулачеву В.П. были высказаны мысли по поводу того, какими свойствами должен был бы обладать идеальный биоантиоксидант (БАО) и который, в частности, (а) нейтрализовывал бы только избыток свободных радикалов и не затрагивал бы их уровень, минимально необходимый для нормального функционирования биологической системы; (б) регулировал бы свободнорадикальные процессы на уровне как гидрофобных, так и гидрофильных компартментов биологической системы в целом; (в) не изменял бы естественные состояния гидратных оболочек, непосредственно окружающих нормальные (нативные) биологические структуры и, более того, стабилизировал бы и то, и другое; (г) не воспринимался бы организмом, как чужеродное вещество, т.е. был бы нетоксичным в целом, неиммуногенным и т.п., а на уровне клетки, не влиял бы на ее нормальный гомеостаз; (д) имитировал бы работу ферментов антиоксидантной защиты, например, был бы СОД-миметиком; (е) работал бы как своеобразный катализатор самонейтрализации свободных радикалов в очень малых дозах и в течение длительного времени (напр. дни, недели) после однократного введения в организм. Как показали наши, более чем 16-и летние исследования, удовлетворить таким требованиям в настоящее время может гидратированный фуллерен С60 (ГФС60, C60HyFn) – супрамолекулярный комплекс сферической молекулы углерода С60 с прочносвязанными, высоко упорядоченными молекулами воды. (http://www1.lsbu.ac.uk/water/buckmin.html). Фуллерен С60, является одновременно и природным, и синтетическим веществом, а его гидратированная форма (ГФС60) проявляет многоплановую, позитивную биологическую активность на уровне как биомакромолекул, клеток, так и целостного организма. Также оказалось, что антиоксидантная эффективность ГФС60 превышает таковую для многих известных БАО в сотни-тысячи раз. Такое, после проведения в Украине официальных фармакологических и клинических испытаний ГФС60 в виде их водных растворов (ВРГФС60, C60FWS), позволило приступить к их госрегистрации в качестве антиоксидантного продукта для профилактики и терапии (дополнительной к основной) широкого круга заболеваний человека. В тоже время, анализ многочисленных фактов универсальной биологической активности ГФС60, в т.ч. и когда он применяется в сверхмалых дозах, однозначно свидетельствует, что причиной этому является не сама молекула фуллерена С60: все биологические эффекты ГФС60 обусловлены особыми структурами воды (ОСВ), которые он вокруг себя способен организовывать и стабилизировать на расстояниях в десятки-сотни раз превышающих размер самой молекулы С60 (~ 1нм) (см. страницу «Фуллерены и вода» на сайте http://www.ipacom.com). Более того, оказалось, что такие ОСВ являются весьма подобными тем структурам воды (мерцающим кластерам), которые она сама по себе, естественным образом формирует в своем объеме. С другой стороны не должно быть удивительным то, что при зарождении Жизни, управляемой свойствами воды, структурные и конформационные особенности важнейших биологических молекул и их содружеств, особенности их гидратации должны были быть отражением структуры и свойств наноразмерных ОСВ. Но, чтобы абиотический синтез учитывал свойств подобных ОСВ, эти структуры должны были бы быть стабильными и долгоживущими во времени. Помочь им в таком должна была некая наноразмерная матрица. И к настоящему времени накопилось достаточно фактов, чтобы полагать, что именно углеродные фуллерены, в содружестве с водой, были той самой матрицей, благодаря которой зарождалась углеродная Жизнь. Косвенным подтверждением этой гипотезы являются уникальные антиоксидантные и радиопротекторные свойства ГФС60 и его растворов, механизмы антирадикальной активности которых, с точки зрения зарождения и развития биологической материи, являются универсальными и определяются структурными свойствами самой воды. Обобщая, можно сказать, что НЕ МОЖЕТ БЫТЬ БОЛЕЕ УНИВЕРСАЛЬНОГО АНТИОКСИДАНТА, А ТОЧНЕЕ, РЕГУЛЯТОРА СВОБОДНО- РАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ, ЧЕМ ВОДНЫЕ СТРУКТУРЫ, УПОРЯДОЧЕННЫЕ ВПОЛНЕ ОПРЕДЕЛЕННЫМ ОБРАЗОМ, и которые, на начальном этапе эволюции биологических молекул, служили им в качестве «защитников» от их расщепления на свободные радикалы, вызываемого действием радиоактивного излучения, жестких ультрафиолетовых лучей, Реактивных Форм Кислорода и т.п.. Действительно, ведь не могла же Природа, порождая Жизнь, ждать, когда из простейших молекул синтезируются «нужные», сложные молекулы антиоксидантов (например, каротиноидов, флавоноидов и т.п), чтобы они в дальнейшем, выступая в качестве антирадикальных защитников, способствовали бы началу целенаправленного синтеза и наработке важнейших биологических молекул – ДНК, РНК, аминокислот и белков, липидов, углеводов и т.п. Экспериментальные факты, подтверждающие вышесказанное, будут приведены и обсуждены в настоящем докладе. ОЦЕНКА АНТИРАДИКАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ЭКСТРАКТА СЕМЯН ЛЬНА И ЕГО КОМПОЗИЦИЙ С ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНОМ Андриуцэ Е.Н., Ильясов И.Р., Тюкавкина Н.А., Белобородов В.Л., Савватеев А.М. ГОУ ВПО Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, г. Москва, ул. 5-ая Парковая, д.21, стр.1, тел. (499)165-37-47, caress.kitten@mail.ru В настоящее время проявляется большой интерес к такой группе биологически активных веществ, как полифенолы. К ним относятся флавоноиды, одним из которых является дигидрокверцетин (ДГК), обладающий широким спектром фармакологической активности. Другими заслуживающими внимания представителями биологически активных полифенолов являются лигнаны, в частности, диглюкозид секоизоларицирезинола (СДГ). Его доступным источником служат семена льна масличного (Linum usitatissimum Linn.). Цель работы – определить антирадикальную активность ДГК, экстракта семян льна и их композиций по отношению к генерированным в модельных условиях радикал-катионам 2,2′-азинобис(3-этилбензотиазолин-6-сульфоната) ABTS+·. Материалы и методы. Объектами исследования были ДГК и сухой экстракт семян льна (содержание СДГ не менее 40%), композиции экстракта семян льна и ДГК при молярных соотношениях их основных компонентов 10:1; 5:1; 1:1; 1:5; 1:10. Оценку антирадикальной активности (АРА) ДГК, экстракта и композиций осуществляли деколоризационным спектрофотометрическим методом, основанным на способности соединений ингибировать предварительно генерируемые в модельных условиях радикал-катионы ABTS+•. В качестве инициатора образования ABTS+· использовали пероксидисульфат калия. АРА выражали как процент ингибирования ABTS+• по формуле: %ингибирования = 100•(1 – А2/А1), где А1 – оптическая плотность раствора ABTS+• в фосфатном солевом буфере на длине волны 730 нм без добавления антиоксиданта, А2 – оптическая плотность раствора ABTS+• через 4 мин после добавления антиоксиданта. Результаты. Экстракт семян льна и дигидрокверцетин ингибируют генерированные радикал-катионы ABTS+· в соответствии с их АРА, что выражается степенью уменьшения концентрации свободных радикалов ABTS+• под действием изучаемых антиоксидантов. Для каждого из исследованных объектов были получены линейные зависимости процента ингибирования ABTS+• в интервале 20-60% от концентрации образца в растворе вида y=ax+b. Линейные зависимости характеризуются коэффициентами корреляции от 0,987 (ДГК) до 0,999 (композиция ДГК:СДГ = 5:1). Для оценки АРА на основании полученных уравнений линейной регрессии рассчитывали IC50 (мг/л) (ДГК – 1,34, СДГ – 8,23, композиции ДГК:СДГ = 1:10 – 9,38, 1:5 – 8,15; 1:1 – 4,81; 5:1 – 2,63; 10:1 – 2,06) и , выраженный как концентрация тролокса (ммоль/л), соответствующая по АРА концентрации 1 мг/л изучаемого объекта (ДГК – 7,29, СДГ – 1,19), композиции ДГК: СДГ = (1:10 – 1,04, 1:5 – 1,20; 1:1 – 2,04; 5:1 – 3,72; 10:1 – 4,75). Для композиций экстракта семян льна с ДГК обнаружен эффект антагонизма, симбатно изменяющийся в интервале от 11,7% (композиция ДГК: СДГ=10:1) до 40,9% (композиция ДГК:СДГ = 1:10). Выводы. Осуществлена оценка антирадикальной активности дигидрокверцетина, экстракта семян льна и их композиций. Установлено, что АРА дигидрокверцетина в шесть раза выше таковой для секоизоларицирезинола диглюкозида. Для композиций экстракта семян льна с дигидрокверцетином обнаружен эффект антагонизма, возрастающий с повышением содержания СДГ в смеси. О ВОЗМОЖНОЙ РОЛИ -КАРОТИНА В СИСТЕМЕ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ МИКРОВОДОРОСЛИ DUNALIELLA SALINA TEOD. Антоненко С.П., Комаристая В.П. Харьковский Национальный университет имени В.Н. Каразина, г. Харьков, Кафедра ботаники и экологии растений, ХНУ имени В.Н. Каразина, пл. Свободы, 4, Харьков, Украина, 61077; +38(066)351-72-43; antonenko_s@yahoo.com В 60-х годах XX ст. было достоверно установлено, что β-каротин, накапливающийся в клетках микроводоросли Dunaliella salina, которая вызывает красное «цветение» гипергалинных водоемов, не принимает участия в процессе фотосинтеза (Миронюк, 1969). Множество работ было посвящено поиску условий индукции каротиногенеза у этого вида микроводорослей; в ряде работ изучались и другие элементы антиоксидантной системы. Выявлено, что в зависимости от условий индуцирования каротиногенеза, в клетках с повышенным содержанием β-каротина либо активизировались все звенья антиоксидантной защиты (каталаза, пероксидаза, СОД, α-токоферол, аскорбиновая кислота, глутатион) (Abd El-Baky et al., 2004) либо происходило снижение активности антиоксидантных ферментов (каталазы, пероксидаз, полифенолоксидазы) (Миронюк, 1969). Недавние работы показали, что ведущим фактором, индуцирующим накопление β-каротина в клетках D. salina является недостаток азота в питательной среде (Lamers et al., 2008). Нашими исследованиями установлено, что даже несколько больший уровень индукции каротиногенеза чем при дефиците азота может быть вызван также дефицитом фосфора (Комаристая и др., 2010). Целью настоящего исследования было определить влияние дефицита азота и фосфора на систему антиоксидантной защиты у Dunaliella salina. Установлено, что помимо накопления -каротина, на дефицит азота или фосфора клетки по-разному реагировали изменением других компонентов системы антиоксидантной защиты: дефицит азота приводил к снижению активности каталазы и содержания белка в клетках; дефицит фосфора, напротив, вел к накоплению белка в клетках; активность каталазы при дефиците фосфора оставалась на уровне контроля. Возможно, при недостатке азота ингибируется синтез белка, что ведет к снижению активности антиоксидантных ферментов и активации ПОЛ. При этом, сверхсинтезированный β-каротин может выполнять функцию защиты мембран. С другой стороны, недостаток фосфора через торможение синтеза НАДФ может приводить к сверхвосстановленности электрон-транспортной цепи хлоропласта и триплетному состоянию хлорофилла. Накапливающийся при этом β-каротин, возможно, предотвращает фотодинамическое разрушение молекул хлорофилла и улавливает высвобождающийся при перевозбуждении хлорофиллов синглетный кислород. ЛИТЕРАТУРА Комаристая В.П., Антоненко С.П., Рудась А.Н. Культивирование Dunaliella salina Teod. при субоптимальных концентрациях азота и фосфора и исключении их из среды // Альгология. – 2010. – 20, №1. – С.42-55. Миронюк В.І. Деякі особливості окисно-відновних систем одноклітинної зеленої водорості Dunaliella salina Teod. // Український ботанічний журнал. – 1969. – Т.26, №1. – С.54-59. Abd El-Baky H.H., El Baz F.K., El-Baroty G.S. Production of antioxidant by the green alga Dunaliella salina // Int.J.Agri.Biol. – 2004. – Vol.6, No.1. – P. 49-57. Lamers P.P., Janssen M., De Vos R.C.H. et al. Exploring and exploiting carotenoid accumulation in Dunaliella salina for cell-factory applications // Trends in biotechnol. – 2008. – 26, №11. – P.631-638. |
Е-86. VII международная Кондратьевская конференция «Контуры экономики будущего», тезисы участников конференции. Международный фонд... | Современный менеджмент: проблемы и перспективы: тезисы докладов науч практ конф. 10 апреля 2008 г./ Ред кол.: В. И. Малюк (отв ред.)... | ||
Желающие принять заочное участие в конференции (с публикацией в сборнике научных трудов) должны направить до 31 августа 2013 г. (включительно)... | Желающие принять заочное участие в конференции (с публикацией в сборнике научных трудов) должны направить до 3 (третьего) марта 2014... | ||
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования | Сборник докладов международной научной конференции «Российская политика соседства» (Москва, 12-13 октября 2007 г.) | ||
Цикличность глобальных процессов, циклы Кондратьева и долгосрочная концепция развития России и глобального мира | Шестого научного конгресса студентов и аспирантов «инжэкон-2013». Доклады студентов и аспирантов представляют результаты научных... | ||
В 2001-2002 годах Фонд «Возрождение Земли Сибирской» организовал два дистанционных курса для некоммерческих организаций России и... | Доклады и тезисы IV международной научной конференции испанистов 1 – 4 апреля 2010 года, мгимо (Университет) мид россии / Отв редактор... |
Главная страница   Заполнение бланков   Бланки   Договоры   Документы    |